搖瓶中的氧氣傳遞效率比生物反應器低得多。多數情況下氧傳遞可能是搖瓶培養的限制因素。 振幅與錐形培養瓶的大小相關:大瓶使用大振幅。
建議:25mm振幅應用于從25毫升到2升的錐形培養瓶
50mm振幅應用于2升至5升的錐形培養瓶
搖床的振幅指托盤在做圓周運動時候的直徑,有時候我們也叫“振蕩直徑”或“軌道直徑”符號:?。
作為標準,Infors提供振幅為3mm,25mm和50mm的搖床。
氧氣傳遞效率是指,氧氣從大氣中傳入到液體中的效率。 OTR數值越高,氧傳遞效率越高。
什么是氧氣傳遞效率(OTR)?
對微孔板和深孔板有兩種不同的方法可以獲得最大的氧氣轉移!
* 50mm振幅,轉速不低于250rpm
* 使用3mm振幅,轉速在800-1000rpm
微孔板和深孔板:
這兩個因素都會影響培養瓶中培養基的混合。 混合效果越好,氧傳遞速率(OTR)就越好。遵循這些指導原則,可以選擇適合的振幅和轉速。
一般來說,選擇25mm振幅可以作為振幅應用于所有培養。
正因為如此,大多搖床的振幅都是25毫米。在一些應用中,如果對氧傳遞/細胞生長有特殊的限制,可能會選擇一些特殊的振幅。
振幅和轉速的影響
什么是搖床的振幅?
細菌,酵母和真菌培養:
* 然而,哺乳動物細胞培養對氧氣的需求相對較低,較低的功率輸入即可。
* 對于250mL搖瓶,在較為寬廣的振幅和振速范圍(20-60mm振幅;
100-300rpm)都可以提供足夠的氧氣傳遞。
* 如果直徑較大的燒瓶(Fernbach燒瓶)推薦使用50毫米振幅
* 使用一次性培養袋,推薦使用50mm振幅。
細胞培養:
在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養量,因為培養量的增加會受到多個因素影響。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,那么無論其他因素有多好,培養量的增長都是有限的,或者可以這樣說,如果培養量的受限因素只有氧傳遞時,振幅的正確選擇會得到明顯的培養箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會達到理想的培養量。
振幅和轉速
振幅和轉速都會對氧傳遞造成影響。如果在轉速很低(比如100rpm)的細胞培養中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達到最高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉速,托盤會適當的平衡轉速。并不是所有的培養物都能夠在高速震蕩下良好生長,一些對剪切力敏感的培養物,高轉速會導致培養物死亡。